Возможности метода ИК - спектроскопии поглощения при изучении биодеградации нефти

Алимбекова Александра Шамилевна
Казанский государственный университет

Научный руководитель: Бадрутдинов Олег Рауфович, канд.физ.мат. наук
Соавторы: -

Одним из приоритетных загрязнителей окружающей среды являются нефтепродукты. При попадании нефти в почву происходят глубокие, необратимые изменения морфологических, физических, физико-химических и микробиологических свойств почвы, что сильно влияет на ее биологическую активность и плодородие [1]. Значительную роль в процессах самоочищения почв от нефти играют микроорганизмы, поэтому интенсивно разрабатываются методы рекультивации нефтезагрязненных почв, основанные на использовании чистых или смешанных культур микроорганизмов в сочетании с различными веществами или обработками, стимулирующими их активность. При этом важно определить, какие компоненты нефти в первую очередь перерабатываются микроорганизмами. Для анализа нефтей и нефтепродуктов, среди методов исследования, большая роль принадлежит методу ИК спектроскопии [2], т.к. ИК-спектроскопия - один из наиболее информативных и чувствительных методов анализа сложных смесей органических соединений, какими являются нефть и ее фракции. В ИК-спектрах сырых нефтей и их фракций обнаруживаются практически все характеристические полосы поглощения основных функциональных групп многоатомных органических молекул. Многокомпонентность состава, внутри- и межмолекулярная структура нефтяных систем обусловливают сложную (по сравнению со спектрами индивидуальных соединений) картину перекрывания и наложения полосы поглощения с искажением их формы и интенсивности. Поэтому часто, прямая качественная интерпретация, а тем более количественные расчеты, связывающие интенсивность поглощения в ИК области спектра с содержанием той или иной функциональной группы - невозможна.

В ИК спектрах- нефтей [3] имеются характерные полосы поглощения в области от 700-2000см-1, с помощью которых определяется степень алифатичности (позволяющая судить о доле парафиновых групп по отношению к ароматическим); разветвленности - отношение содержания метильных и метиленовых групп (низкие значения разветвленности парафиновых структур, означают, что в нефти содержится много парафиновых структур н-строения, вклад в которые состоит из парафиновых углеводородов и заместителей. Разветвленность растет при наличии процесса биохимического окисления и, наоборот, падает при химическом окислении); окисленность (С=О), определяемая из отношения содержания карбонильных групп по поглощению на частоте 1700см-1 к ароматическим С=С-связям, свидетельствующая не только об окислении нефти воздухом, но и ее окислении микроорганизмами. По этим трем параметрам можно судить о процессах происходящих при воздействии микроорганизмов на нефтезагрязненную почву.

В качестве объекта исследования была взята дерново-подзолистая почва, содержащая аборигенные углеводородокисляющие микроорганизмы. Работа проводилась на приборах АН-1, где изучались динамические процессы биодеградации и на приборе "Specord-80".

По записанным спектрам в оптических плотностях определяется наличие интересующих функциональных групп: 1700см-1 - окисленность (С=О); 1600см-1 - ароматические (С=С); 1380см-1 - метильные СН3; 720см-1 - метиленовые СН2. В спектрах наблюдаются индивидуальные полосы почвы. Эти полосы можно выбрать в качестве внутреннего стандарта, с учетом которого исчезает влияние на спектр толщины нанесенного слоя. По полученным спектрам измеряются оптические плотности указанных выше пиков и производится расчет алифатичности, разветвленности и окисленности с учетом внутреннего стандарта. Для этого находится полоса поглощения гумусовых кислот почвы на частоте 900см-1 и производится перерасчет оптических плотностей зависящих от толщины поглощающего слоя. Полученные данные приведены в таблице:

Объект

Содержание структурных групп

(Оптическая плотность)

СН3\СН2

СН2

СН3

(СН2+СН3)/С=С

С=О

Почва+нефть

0.829

5.029

2.75

2129.

6.066

Почва+нефть+ бактерии

0.57

7.67

1.48

4.97

13.456

По итогам работы можно сделать следующие выводы:

1. Метод ИК спектроскопии поглощения позволяет выбрать наиболее информативную область, в которой на определенных частотах происходит поглощение энергии инфракрасного излучения.

2. По интегральному поглощению углеводородов в области 3000см-1 можно судить об общем содержании нефтепродуктов в почвах и изучать динамические процессы, происходящие при взаимодействии нефтеокисляющих микроорганизмов с загрязненной нефтью почвой.

3. При работе в области частот от 700-2000см-1, в которой находятся спектры поглощения СН2, СН3, С=С, и С=О-связей методика существенно усложняется. Поскольку все растворители в этой области спектра имеют собственные полосы поглощения, приходиться после экстрагирования нефтепродуктов отгонять растворитель и только после этого прописывать спектр. Причем оставшаяся после отгонки часть является по консистенции пастообразной, что затрудняет поддержание во всех экспериментах равной оптической толщины, особенно в конце биодеградационных процессов, когда остаются битуминозные компоненты. Это не позволяет определять содержание нефтепродуктов в абсолютных величинах, а приходится судить о биодеградационных процессах в относительных единицах, по отношению оптических плотностей на выделенных полосах поглощения.

4. В результате биодеградационных процессов увеличивается окисленность нефти, т.е. внесенные микроорганизмы активно окисляют нефтепродукты..

5. Увеличение разветвленности также свидетельствует о биодеградационных процессах.

6. Уменьшение алифатичности говорит об увеличении ароматики и уменьшении СН3+СН2, а именно СН2 группы на частоте 720см-1, т.е. метиленовые группы подверглись разложению.

7. Следовательно, при биохимическом окислении уменьшается доля парафиновых структур.

Список литературы:

[1] В.Н.Иванов, Е.В.Дульгеров, Микробиологический журнал,.56 6 (1994) 45.

[2] А.Д.Семенов, "ИК спектрофотометрические методы определения нефтепродуктов в поверхностных водах", в кн.: Методы анализа природных и сточных вод, Москва (1977).

[3] Л.М. Петрова, докт. диссертация "Состав и свойства остаточных нефтей", Казань (1998).

Список публикаций:

[1]Алимбекова А.Ш., Бадрутдинов О.Р., сборник статей четвертой молдежной научной школы "Когерентная оптика и оптическая спектроскопия", 145-150, (2000).

(c) АСФ России, 2001